两宫皇太后与八大臣尤其肃顺早有矛盾，这种矛盾最早发生于那拉氏与肃顺之间。那拉氏热衷参与政事，而且观点常与肃顺相左，两人曾不止一次当着咸丰的面争吵。典型事例就是英法联军入侵时，肃顺主张抚议及“巡幸木兰”，那拉氏却主战且力阻北逃。事后肃顺不满于后宫干政，而那拉氏也对肃顺辈很是厌恶。
这种政治上的龃龉还延伸到了日常。圆明园有新旧两个园门，新园门离北京城较近，为皇帝专用，臣工进园被要求走旧园门，一般情况下不得因贪捷径而走新园门。一天，咸丰和那拉氏登高望远，忽见一行车骑直趋新园门，一问原来是肃顺所为，咸丰当场发怒，命令侍卫持鞭上前，将肃顺赶出了圆明园。肃顺认为皇帝一向待他优厚，何至于如此不给面子？打听下来，原来当时那拉氏就在咸丰身边，便料定是那拉氏从中挑唆，对其愈加不满。
咸丰逃奔热河时非常仓促，饮食、用具、车马等途中必备之物都未能带全。妃嫔们所乘的车马是肃顺临时从集市上雇来的，骡马瘦弱，车子破旧，在平路上行驶已很困难，进入山路后更是颠簸得令人难以忍受。妃嫔们平时全是娇生惯养，哪里吃过这个苦头。那拉氏正好看到肃顺的骡车从旁边经过，便请求肃顺给她换辆好点的车马。肃顺随口答应，说到前站再说，然而当车队到达前站时，不知他是蓄意报复，还是无意为之，反正当那拉氏派人前去询问时，却被以“无暇顾及”为由推托掉了。
之后那拉氏遇到肃顺时再次提出了换车的要求，肃顺当即拉下脸来，厉声呵斥道：“连中宫（皇后）都乘坐敞车，你又有何不可，难道还要位列中宫之上不成？”那拉氏再不敢多言，但从此却对肃顺更加怀恨在心。
肃顺当然也能感觉得到那拉氏的敌意。咸丰逃到热河后，身体极度虚弱，经常咯血，他想到，一旦咸丰驾崩，必然会由皇长子载淳继位（咸丰有两个儿子，但次子出生当日就死了），那拉氏的地位将直线上升，于己大不
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